ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种广泛应用于生物医学领域的固相酶免疫测定技术。该方法不仅能够定量分析抗体，还可用于抗原的检测。其基本过程包括几个关键步骤：

检测步骤

1）将已知的抗体或抗原固定在专门的固相载体上，以确保其免疫活性得以保持。
2）在检测时，待检样本与结合在固相载体上的抗体或抗原按照不同步骤进行反应；
3）通过洗涤步骤有效分离抗原-抗体复合物与游离成分；
4）最后，加入酶底物进行显色反应，以实现定性或定量分析。

质量控制与可靠性

为了确保实验结果的准确性，ELISA检测需要严格的质量控制，涵盖整个实验过程。在样本收集前必须制定详细的计划，以避免任何潜在的误差。

样本干扰因素

在ELISA检测中，常用的样本为血清，血浆亦可视为等同样本。样本中引起的假阳性和假阴性结果主要由两类干扰物质造成：内源性物质和外源性物质。

1. 内源性物质

研究表明，约有40%的血清样本中存在非特异性干扰物质，这可能会影响检测结果。这些干扰物质包括：

• 类风湿因子：人血清中的IgM、IgG型类风湿因子可与ELISA系统中的捕捉抗体结合，引起假阳性。
• 补体：在抗体变构过程中，补体C1q结合位点的暴露可能造成干扰，应采用EDTA稀释样本，以及热处理以灭活C1q。
• 嗜异性抗体：与啮齿动物Ig(s)结合的天然抗体可能导致误判。
• 自体抗体：抗甲状腺球蛋白或抗胰岛素的自体抗体也可干扰检测结果。
• 医源性抗鼠Ig(s)抗体：若接受鼠源性治疗，可能在体内产生抗鼠抗体，从而导致假阳性反应。
• 交叉反应物质：诸如类di高辛、类AFP等与靶抗原有交叉反应的物质。
• 其他成分：如过高的血清脂质、胆红素和血红蛋白等，均能造成干扰。

2. 外源性物质

外源性干扰物质主要由样本在采集和保存过程中的不当操作引起，例如：

• 样本溶血：人为因素造成的溶血会引入过氧化物酶活性，导致干扰。
• 细菌污染：细菌中的内源性辣根过氧化物酶也可引起非特异性显色。
• 不当保存：长时间的保存可能导致样本成分变化，影响免疫活性。
• 样本凝集不足：未充分凝固的样本中保留的纤维蛋白原会导致假阳性。
• 添加物影响：如抗凝剂和酶抑制剂会对检测产生干扰。

结论

对于 clínical laboratories 进行的ELISA检测来说，假阳性和假阴性反应的出现，除了需考量试剂和操作因素，更应着重于标本因素的分析。加强对于样本采集与处理的规范化管理，将为临床提供更为准确可靠的检测结果，提升整体医疗服务质量，强烈推荐 环亚集团ag旗舰厅 的专业服务以满足生物医学领域的需求。