本试剂盒专为科学研究设计，严禁用于医学诊断。本文将介绍人巨噬细胞炎性蛋白5（MIP-5）Elisa试剂盒的使用说明书及检测原理。

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预先包被adropin（AD）抗体的微孔中，依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体，经过适当的温育和彻底洗涤。利用TMB底物进行显色，TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色，并在酸性条件下变为最终的黄色。显色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度呈正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定光吸收度（OD值），从而计算样本的浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用无热源和内毒素的试管，并在操作过程中避免任何细胞刺激。在收集血液后，3000转速离心10分钟，以快速小心分离血清和红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理。通过3000转速离心30分钟后，取出上清液。

3. 细胞上清液：同样采用3000转速离心10分钟，去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合后进行捣碎，随后3000转速离心10分钟获取上清液。

5. 保存：若样品在收集后未能及时检测，应按一次用量分装并置于-20℃冷冻存储，以避免反复冻融。在检测前，应将样品在室温下解冻，并确保其均匀充分解冻。

操作注意事项

试剂盒包含标准品（S0-S5），其浓度依次为：0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释：将蒸馏水按1:20比例稀释，具体为1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。

洗板方法

操作步骤包括：使用Excel绘制标准曲线，以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，得出标准品的线性回归曲线，并按照曲线方程计算各样本的浓度值。

试剂盒性能免责声明

本试剂盒的使用仅限于科学研究，任何不当使用将不承担相关责任。建议用户遵循操作规范，提高实验的可靠性与精准度。

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