实验材料准备

选择2周龄或重约200克的SD大鼠。需准备灭菌器械，包括镊子、眼科直剪、眼科弯剪及磁珠等。同时，还需使用5mL的注射器、022μm的滤器、泡沫板以及图钉以固定大鼠。为了确保无菌环境，使用75%乙醇进行消毒。此外，还需准备预冷的无菌PBS水、15mL和50mL的无菌离心管、细胞筛及无菌培养瓶等材料。培养基则为SD大鼠脂肪间质干细胞完全培养基。

实验操作

在超净工作台内，将所需材料进行紫外消毒，时间约为30分钟。配制约5mL的0.1%Ⅰ型胶原酶，并经过过滤去除杂质。将大鼠通过颈部处死后，浸泡于75%酒精中约2-3分钟，然后放置在超净工作台上并用泡沫板固定。小心剪开大鼠腹股沟区域的皮肤，直至腹腔，暴露出脂肪组织。仔细剪取脂肪组织，并放入PBS中，避免损伤血管。随后，用PBS洗涤脂肪组织，并除去多余的血管和淋巴结。

将脂肪组织剪碎至适当大小（如2mm×2mm），加入胶原酶，在37℃条件下进行消化，并每隔5分钟进行震荡或持续搅拌。消化完成后，将细胞悬液转移至离心管中，经过离心处理后，弃去上层的脂滴泡沫和上清液，使用培养基重悬沉淀的细胞。细胞悬液需经过过滤，随后再次离心并弃去上清液，用培养基重悬，并将其接种到培养瓶中。最后，将培养瓶放入37℃、含有5% CO2的培养箱中进行培养。

注意事项

在实验过程中，必须保持无菌操作，以避免细胞污染。脂肪组织的采集与清洗必须小心进行，以防损伤细胞或引入杂质。消化时应严格控制时间和温度，以避免过度消化所导致的细胞损伤。此外，在离心和过滤过程中应轻柔操作，以减少细胞损失或破裂的风险。

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